（1）热力消毒灭菌方法：利用热力使微生物的蛋白质凝固和变性，细胞膜发生改变，酶失去活性，以达到消毒灭菌的目的。分为干热法和湿热法，干热法通过空气传导热力，导热较慢，所需温度较高、时间较长;湿热法通过水蒸气、水及空气传导热力，导热较快、时间较短、温度较低。
①燃烧法：属于干热法，是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。适用于不需保留的物品，如污染的纸张、废弃物、感染敷料等，可直接焚烧;急用搪瓷类物品和金属器械时，搪瓷类容器可将95%乙醇溶液置入容器，使乙醇分布均匀，点燃至熄灭。器械可放在火焰上烧灼20秒。在燃烧时应注意远离易爆物品，中途不得添加乙醇。贵重器械及锐利刀剪(以免变钝)禁用燃烧法。
②干烤法：将物品放于干烤箱内，热力通过空气对流和介质传导进行消毒灭菌，适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品。如：粉剂、油剂、玻璃器血及金属制品的灭菌。不适用于塑料制品、纤维织物等的灭菌。消毒时箱温应在120～140℃，时间10～20分钟;灭菌时箱温在160℃，时间2小时;箱温170℃，时间l小时;箱温180℃，时间为30分钟。
③煮沸消毒法：属于湿热法。用于耐湿耐高温的物品，不能用于外科手术器械的灭菌。水沸后开始计时，5～10分钟可杀灭细菌繁殖体，15分钟可将多数芽胞杀灭，破伤风杆菌芽胞需煮沸60分钟才可杀灭。加入碳酸氢钠至1%～2%浓度时，沸点可达105oC，既可增强杀菌作用，又可去污防锈。注意事项：消毒前先将物品刷洗干净，物品需完全浸没，玻璃类用纱布包好，于冷水或温水时放入，橡胶类用纱布包裹，水沸后放入;器械的轴节及容器的盖要打开，大小相同的碗、盆不能重叠;从水沸后开始计时，若中途加入物品，应从再次水沸后重新计时;消毒后，及时取出物品，放置在无菌容器内;海拔每增高300m，消毒时间延长2分钟。
④压力蒸汽灭菌法：是应用最广、效果最可靠的首选灭菌方法。属于湿热法。利用高压下的高温饱和蒸汽杀灭所有微生物及其芽胞，适用于耐高温、耐高压、耐湿的物品，如各种器械、敷料、搪瓷类、玻璃制品、橡胶类、某些药品、溶液、细菌培养基等的灭菌。一般压力达103～137kPa、温度达121～126℃时，经20～30分钟达灭菌效果。须注意包不宜过大、过紧，卧式压力蒸汽灭菌器物品包不大于30cm×30cm×25cm，预真空压力蒸汽灭菌器物品包不大于30cm×30cm×50cm，物品之间留有间隙;布类物品放在金属、搪瓷类品之上，避免蒸气遇冷成水珠，使布类潮湿;容器应有孔，灭菌前将孔打开，灭菌后关闭;灭菌物品干燥后方可取出;效果监测最常用的是化学监测法(化学指示卡或指示胶带)，最可靠的监测方法是生物测试法。
（2）光照消毒法(又称辐射消毒)：利用紫外线、臭氧及高能射线，使菌体蛋白发生光解、变性，菌体内的核酸、酶遭到破坏而致微生物死亡。
①日光暴晒法：用于床垫、毛毯、衣服、书等物品的消毒。方法：将物品直接放于日光下，暴晒6小时可达消毒效果，每隔2小时翻动1次。
②紫外线灯管消毒法：紫外线灯的最佳的杀菌这长是250～270nm，用于空气和物品表面的消毒。空气消毒时有效照射距离不应超过2m，照射时间20～30分钟;物品表面消毒时有效照射距离不应超过25～60cm，
照射时间20～30分钟，物品应摊开或挂起并定时翻动。消毒时间应从灯亮起后5～7分钟计时。注意事项：要求病室温度20～40℃，相对湿度40%～60%。保护眼睛和皮肤，嘱病人不直视紫外线灯源，可戴墨镜或用纱布遮住眼睛，身体应用被单遮住，以免引起眼炎及皮肤的红斑。保持紫外线灯管的清洁，可用无水乙醇纱布每2周擦拭1次，灯管注意要轻拿轻放。关灯后须冷却3～4分钟后再开。建立使用登记卡，时间超过1000小时时则应更换。定期检测紫外线的照射强度，每3～6个月检测1次，强度低于70µW/cm2时应更换。定期空气培养，以检查效果。
③臭氧灭菌灯消毒法：利用臭氧的氧化作用而杀菌，主要用于空气、污水、诊疗用水及物品表面的消毒。使用时关闭门窗，人员离开，消毒结束后30分钟方可进入。
（3）电离辐射灭菌法：又称冷灭菌，主要是应用核素60Co发射的γ射线或电子加速器产生的高能电子束穿透物品，杀死其中的微生物。适用于不耐热的物品灭菌，如橡胶、塑料、高分子聚合物(一次性注射器、输液输血器等)、精密医疗仪器、生物医学制品、节育用具及金属等。
（4）微波消毒灭菌法：微波可杀灭细菌繁殖体、真菌、病毒、细菌芽胞、真菌孢子等各种微生物。优点是作用时间短、方便。多用于食品、食具、药杯等小物品的消毒。水是微波的强吸收介质，对于干燥物品需要先湿化处理后再行消毒。常用于食品、餐具的处理，化验单据、票证的消毒，医疗药品、耐热非金属材料及器械的消毒灭菌。微波无法穿透金属，不能用于金属物品的消毒。
（5）过滤除菌：通过过滤器可除掉空气中0.5～5μm的尘埃，达到洁净空气的目的。用于烧伤病房、手术室、器官移植病房等。
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